Tipy pro použití enzymů

‌Tips pro používání enzymů‌ zahrnují hlavně následující aspekty:

‌Control reaction conditions‌: The activity of enzymes is affected by factors such as temperature, pH value, and ion concentration{{0}} For example, the optimal reaction conditions for TG enzyme are pH 7.0-8.0 and temperature 37℃‌. For universal nuclease, the optimal pH is 8.0, the Nejvyšší teplota aktivity je 37 stupňů a rozsah teploty enzymatické aktivity je 0 ~ 42 stupňů ‌.

‌Determine the dosage‌: Select the appropriate enzyme dosage according to the purpose of the experiment and the desired effect. It is recommended to conduct a small-scale experiment first, observe the effect, and then adjust the dosage as needed‌. For example, for eukaryotic cell lysate, generally add 1ul, or 500 units of nuclease, for every 106~107 Cells‌ .

‌Prepare Solution‌: Rozpusťte enzym ve vhodném vyrovnávací paměti, jako je Tris-HCI, PBS atd. ., doporučuje se použít sterilní operační prostředí, aby se zabránilo mikrobiální kontaminaci . Měla by být upravena podle experimentálního potřeb

Podmínky „Storage ‌: Enzymy by měly být skladovány za vhodných podmínek teploty a vlhkosti a vyhnout se vystavení nevhodnému prostředí, jako je vysoká teplota, vlhkost a světlo . Například, například s tím, že se s ním zabrání, je 1 rok, je předkládáno, že je třeba zabránit tomu, aby se zabránilo tomu, aby se zabránilo tomu, aby se zabránilo tomu, aby se více než zabránilo, je to zabráněno. Mikrobiální kontaminace . ‌
‌Common Problémy, které se mají vypořádat, se můžete setkat s některými problémy během používání, jako je inhibice enzymatické aktivity a prodloužená reakční doba . Například, běžné činidla, jako je EDTA a guanidin hydrochlorid, mají inhibiční účinek na aktivitu univerzálního nukleázy, a tyto účinky mohou být kompenzovány kontrolou inhibitorů a zvyšování koncentrace . ‌
Metody ‌inaktivace a odstraňování‌: U nukleáz, které je třeba inaktivovat, lze použít extrémní podmínky, jako je 100 mm a 70 stupňů po dobu 30 minut, . Nucleasy lze odstranit chromatografií pro aniontovou výměnu, gelovou filtraci a další metody .